ORIGINAL DEVELOPMENTS
 OF IMMUNOREHABILITATION LABORATORY
FOR INTRODUCTION

  Modified method of adoptive immunotherapy
for cancer patients treatment

Authors:

Martynov A.V., Smelyanskaya M.V., Peremot S.D., Kislichenko V.S.

Human’s organism consists a milliards cells and it is statistically impossible, that though part from them not mutated under the action of various carcinogenic factors. This mutations can be caused by viruses, carcinogens, radiations or other unstudied factors. Reason of cancerogenesis does not matter for effective treatment. The great number of people always lives in similar ecological dangerous situation, but a cancer insignificant part is ill only from them. There is a logical question: what two groups of people, being in identical external terms differ: one of which with cancer, and other – no? In a norm induced of a cancer in the human’s organism are destroyed by the immune system. It seems that in case with the group of people which a cancer developed at, the immune system was not able in time to find out cells-mutants and destroy them. Thus, differences of these two people’s groups  consists the defect of immune system in a group with cancer diseases. It is confirmed by indirect information: people, infected HIV/AIDS or accepting immunodepressants after organ’s transplantation in oftentimes are more frequent ill cancer diseases, what other people. The genetic innate defects of the immune system in this case make insignificant part among reasons of cancer-induced immunodeficiency (less than 0,2%). What at that rate does violate work of the immune system? It is confirmed our researches [1-5 ], that in cancer patients more than 66 % immune system cells it is infected by latent viruses of herpes group (as a rule at once a few – by the virus of Epstein – Barr, cytomegalovirus and Herpes simplex viruses  ). In a control group – patients with active herpetic infection, but without cancer  – the percent of the infected immunocytes did not exceed 17-23 %. Thus, in our opinion, cause of  immune system inability to destroy cancer cells is in their infected herpes viruses. Will such lymphocytes, that consists «trojan horse» in itself as viruses be able, to militate with cancer? By analogy: will a sportsman with a flu and high temperature on equal to exam with healthy sportsmen? Naturally – no. Part of normal lymphocyte’s resource is used by persistent herpes viruses for the producing of viral Di-particles. Naturally, this part of immunocyte’s resource is not used for  main purpose, namely in a fight against cancer. Coming from these information, very unexpected way for treatment of cancer pathologies follows as cleaning of the immune system from cells infected by viruses with the use of anti-viral preparations on the first stage and activating of lymphocytes on the second.

The task of the first stage treatment does not consist of complete recovery of patient from the herpes viruses , and in the temporal stopping of viruses replication in immune system cells with the purpose the renewal of physiological «health» of the immune system for providing of its further stimulation against a cancer. The second stage is activating of lymphocyte’s  blast transformation by interleukin-2 [6] (activator BTL) in combination with a alpha-interferon [7] (protected the healthy lymphocytes from infecting and kills the cells infected by viruses), lectine from the sheet of currant [8,9] (activates the BTL in CD8 – cells ), cyclophosphamide (preferentially kills the suppressors lymphocytes). Unlike the method of S. Rozenberg’s adoptive immunotherapy  we apply the liposomal [10] form of interleukine-2. It allows to activate not only LAK-cells and TI-cells but also all immunocytes because they uptake liposome with interleukin -2 passing the CD25 receptor through passive transport - confluence with a cellular membrane. In this case the amount of  blood for activating  it is sharply diminished to 20-40 ml, and BTL increases literally to 90-95%, thus on all lymphocyte’s subpopulation .

Because the interleukin-2 and the a-interferon are human’s proteins, studying them on animals is senselessly. In addition, both these preparation successfully used separately as medicinal preparations (Ronkoleukin and Laferobion).   Application of such schema was effective in treatment of cancer patients - volunteers with  4th stage of malignant tumours . There were protracted remission and regression of metastases for 62% patients with incurable cancers, prostate gland, stomach, buds, melanomas, cancer of uterus neck , nonsmallcells cancer of lungs and other.  The improvement of the patient’s general state comes literally for the week of treatment. Adaptation to therapy is not observed, because therapy is directed not on elimination of cancer, but on a rehabilitation and start of immunological reactivity against a tumour. In the case of cancer relapse the METHOD is WORKS however. A course of treatment is 10-15 droppers depending on patient’s weights and disease state. The mass production of еру preparation is impossible because that drug prepares from blood from concrete patient. Preparation is absolutely specific a concrete patient and concrete tumour. The immunorehabilitation laboratory searches an investor for openings of a few clinics for method’s application. A method belongs to the group of «blood’s surgery» and «specific cancer adoptive immunotherapy», it is not the new preparation and needs trained personnel for apply methods. A method has a row of know-how (from the method of immunocytes cleaning from persistence viruses, method for interleukine-2 incorporation into liposomes, time and temperature of blood incubation and to the method of extraction and purification of the  lectin from currant - glucoribin)   without which efficiency falls practically to the zero, although part of technology and protected by patents. Development of technology proceeded more than 10 years and presently we can quickly open out a laboratory and to begin to used a method in a clinic.

DISBELIEVE US , CHECK up THE METHOD. ALL of METHOD’S INGRIDIENTS is SETTLED to APPLICATION, WORKING INSTRUMENT of METHOD is CELLS of IMMUNE SYSTEM from CONCRETE PATIENT.

On all questions about  application and introduction of the method request to speak the academic secretary of the institute

Arthur Martynov by Tel. +380632343786 or E-mail: imiamn@mail.ru 

IN RUSSIAN:........................................................................................................................................................

ОРИГИНАЛЬНЫЕ РАЗРАБОТКИ ЛАБОРАТОРИИ ИММУНОРЕАБИЛИТОЛОГИИ ДЛЯ ВНЕДРЕНИЯ

Модифицированный метод адоптивной иммунотерапии рака

Авторский коллектив разработки в соавторстве с кафедрой химии природных соединений Национального фармацевтического университета Украины:

Мартынов А.В., Смелянская М.В., Перемот С.Д., Кисличенко В.С.

Организм человека состоит из миллиардов клеток и статистически невозможно, чтобы хоть часть из них не мутировали под действием разнообразных канцерогенных факторов. Причиной таких мутаций могут быть вирусы, канцерогены, излучения или другие неизученные факторы. Для эффективного лечения не имеет значения причина возникновения в организме раковых клеток. В подобных неблагоприятных условиях всегда живет множество людей, но раком болеет только незначительная часть из них. Возникает логичный вопрос: чем же отличаются две группы людей, находящихся в одинаковых внешних условиях: одна из которых с онкопатологией, а другая – нет? В норме возникающие в организме человека раковые клетки уничтожаются иммунной системой. Выходит, что в случае с группой людей, у которых развился рак, иммунная система не была способна вовремя обнаружить мутировавшие клетки и уничтожить их. Таким образом, отличия этих двух групп людей состоит в дефекте иммунной системы в группе с онкологическими заболеваниями. Это подтверждают и косвенные данные: люди, инфицированные ВИЧ/СПИД или принимающие иммунодепрессанты после трансплантации органов во много раз чаще болеют раковыми заболеваниями, чем остальные люди. Генетические врожденные дефекты иммунной системы в данном случае составляют незначительную часть среди причин онкоиндуцирующих иммунодефицитов (менее 0,2%). Что же в таком случае нарушает работу иммунной системы? Нашими исследованиями [1-5 ] подтверждено, что у онкологических больных более 66 % клеток иммунной системы инфицировано латентными вирусами группы герпеса (как правило сразу несколькими – вирусом Эпштейна – Барр, цитомегаловирусом и вирусами простого герпеса). В контрольной же группе – пациентов с обострением герпеса, но без онкопатологий  – процент инфицированных иммуннокомпетентных клеток не превышал 17-23 %. Таким образом, на наш взгляд, причина неспособности иммунной системы уничтожить раковые клетки лежит именно в их инфицированности вирусами группы герпеса. Смогут ли такие иммуноциты, несущие в себе «троянских коней» в виде вирусов, бороться с раковыми опухолями? По аналогии: сможет ли спортсмен, больной гриппом с температурой 39⁰ С на равных соревноваться со здоровыми спортсменами? Естественно – нет. Часть нормального ресурса лимфоцита используют персистирующие герпесвирусы для своих нужд – продуцирования т.н. Di-частиц. Естественно, эта часть ресурса иммунокомпетентных клеток не используется по прямому назначению, а именно в борьбе с мутировавшими раковыми клетками. Исходя из этих данных, следует весьма неожиданное направление лечения онкопатологий в виде очистки иммунной системы от инфицированных вирусами лимфоцитов на первом этапе с применением антивирусных препаратов и активации иммуноцитов на втором. Задача первого этапа лечения не состоит в полном излечении пациента от вирусов группы герпеса, а во временной остановке репликации вирусов в клетках иммунной системы с целью восстановления физиологического «здоровья» иммунной системы для обеспечения дальнейшей ее стимуляции против опухоли. Второй этап предложенной нами схемы лечения состоит в активации бластной трансформации лимфоцитов интерлейкином-2 [6] (активатор БТЛ) в комбинации с альфа-интерфероном [7] (блокирует от заражения вирусами здоровые лимфоциты и убивает зараженные вирусами клетки), лектином из листа смородины [8,9] (активирует БТЛ CD8 клеток), циклофосфамидом (избирательно убивает субпопуляцию клеток- супрессоров). В отличие от метода адоптивной иммунотерапии С. Розенберга мы применяем липосомальную [10] форму интерлейкина-2. Это позволяет активировать не только ЛАК-клетки и TI-клетки, но и все иммуноциты благодаря тому, что липосомы с интерлейкином -2 проникают в клетки минуя рецептор CD25 интерлейкина  -2 через слияние с клеточной мембраной и пиноцитоз. В этом случае количество аутологичной крови для активации резко сокращается до 20-40 мл, а БТЛ возрастает буквально до 90-95%, причем по всем субпопуляциям иммуноцитов.

В связи с тем, что интерлейкин-2 и альфа-интерферон – это человеческие белки, изучение их на животных в рамках данной схемы бессмысленно. Кроме того, оба эти препарата успешно применяются отдельно как лекарственные препараты (ронколейкин и лаферобион).  Применение такой схемы было эффективно в лечении пациентов - добровольцев со злокачественными опухолями 4-й стадии. Наблюдались длительные ремиссии и рассасывание метастазов у 62% пациентов с инкурабельными опухолями молочной железы, предстательной железы, желудка, почек, меланом, раке шейки матки, немелкоклеточного рака легких и др. Улучшение общего состояния наступает буквально за неделю лечения. Привыкания к терапии не наблюдается, так как терапия направлена не на уничтожение рака, а на реабилитацию и запуск иммунной реакции против опухоли. В случае рецидива МЕТОД ВСЕ РАВНО РАБОТАЕТ. Курс лечения – 10-15 капельниц в зависимости от тяжести состояния пациента. В связи с тем, что препарат готовится из крови конкретного больного, массовый выпуск препарата невозможен. Препарат абсолютно специфичен конкретному больному и конкретной опухоли. Лаборатория иммунореабилитологии ищет инвестора для создания сети клиник для применения метода. Метод относится к группе методов «хирургии крови» и «специфичной адоптивной иммунотерапии рака», его невозможно отнести к новым препаратам и применять его может только обученный персонал. Метод имеет ряд Ноу-Хау (от метода очистки иммуноцитов от персистирующих вирусов, способа введения интерлейкина в липосомы, времени и температуры инкубации с кровью и до способа получения лектина смородины - глюкорибина)  без которых эффективность падает практически до нуля, хотя часть технологии и защищена патентами. Разработка технологии продолжалась более 10 лет и в настоящий момент мы можем быстро развернуть лабораторию и наладить методику в любой клинике.

НЕ ВЕРЬТЕ НАМ НА СЛОВО, ПРОВЕРЬТЕ МЕТОДИКУ. ВСЕ ИНГРИДИЕНТЫ МЕТОДИКИ РАЗРЕШЕНЫ К ПРИМЕНЕНИЮ, РАБОЧИЙ ИНСТРУМЕНТ МЕТОДА – КЛЕТКИ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ КОНКРЕТНОГО ПАЦИЕНТА.

По всем вопросам относительно применения и внедрения метода просьба обращаться к ученому секретарю института доктору фармацевтических наук
Мартынову Артуру Викторовичу по тел. +380632343786 или E-mail: imiamn@mail.ru  

Опубликованные  работы, касающиеся данного метода адоптивной иммунотерапии:

1. Martynov A.V., Shmatko Yu.V., Smelyanskaya M.V., Peremot S.D., Vinnik Yu.M. Detection of herpes virus type 1 antigen in lymphocytes and tumor tissue of patients with cancer of uterus // Exp. Oncology. - 2002.- Vol. 24, N 2. – P.120-122

2. Смелянская М.В., Перемот С.Д., Мартынов А.В. Персистирующие герпесвирусы как потенциальный тригер-фактор соматических заболеваний // Анн. Мечн. Инст.-2006.- № 4.-С.29-34
3. Мартынов А.В., Смелянськая М.В., Перемот С.Д., Сорочан П.П., Никифорова Н.А., Влияние герпесвирусной персистенции в иммуноцитах на состояние иммунной системы онкологических пациентов // Современные инфекции - 2004.-N 1.-С.25-30
4. Мартынов А.В., Смелянськая М.В., Перемот С.Д., Сорочан П.П., Никифорова Н.А. Взаимосвязь персистенции герпесвирусов в иммуноцитах на состояние иммунной системы онкологических пациентов // Журнал АМН Украины.-2004.- Т. 10, № 2.- С.385-391
5. Martynov A.V. Analysis of the low effectiveness causes of modern treatment methods of cancer mal-formations // Ann.  Mech. Inst.-2002.-N 2-3.- P.57-60
6. Ясная Н.С., Мартынов А.В. Сравнение эффективности фармакопейного биологического метода определения концентрации ронколейкина (интерлейкина-2) с иммуноферментным методом  и ВЖХ методами // Фармацевтический журнал- 2006 - № 1, С. 70-73
7. Мartynov А.V., Smelyanskaya M.V. Antiproliferative properties of chemically modified a-2b-recombinant interferon // J. of Interf. & Cytokine res.- 2005.-Vol. 25, N 7.- P. 414-417
8. Мартынов А.В., Смелянская М.В., Кожух И.О., Волькович О.О., Попова Н.В., Кисличенко В.С. Противоопухолевая активность  растительных гликопротеидов, афинных к иммуноглобулинам класса G // Фармацевтический журнал.- 2000.-№ 5.-С.78-80
9. Мартынов А.В., Кисличенко В.С., Смелянская М.В., Перемот С.Д., Сапожникова Н.Ф. Изучение противоракового действия разных фракций экстракта смородины черной //Клиническая фармация.-1998.-Т.2, № 3.-С.89-91
10. Кучма И.Ю., Волянский А.Ю., Москаленко В.Ф., Ткачук Т.В., Доброскок  А.И., Мартынов А.В., Смелянская М.В., Перемот С.Д. Применение фенилимида цис-аконитовой кислоты в липосомальной форме для терапии герпеса.// ЖМЭИ.- 2000.-№ 5.- С.58-61